Novum Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acidum Detection Kit
New Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit
(Fluorescent RT-PCR Probe Method) Product Manual
.Product name .Novum Coronavirus (SARS-Cov-2) Nucleic Acidum Detection Kit (Fluorescent RT-PCR Probe Method)
.Packaging specifications .25 Test/Kit
.Intended usaetas.
Hoc ornamentum adhibetur ad detectionem acidi nucleici qualitative e novis coronaviris in swabis nasopharyngeis, oropharyngeis (faucibus) swabibus, swabibus nasalibus anterioribus, obiectis turbinatis mediis, lavat nasi et aspirationes nasi ab hominibus qui suspecti sunt de COVID19 ab eorum provisore sanitatis. Deprehensio ORF1ab et N genes novae coronaviri adhiberi possunt pro diagnosi auxilia et epidemiologica vigilantia novae infectionis coronaviri.
.Principles of the procedure .
Hoc ornamentum TaqMan certis exploratoribus designatum est et primariis specialibus ad novum coronavirum destinatum (SARS-Cov-2) ORF1ab et N sequentiarum generum. Solutio PCR reactionis continet 3 formas singularum primariorum et fluorescentium speculationum ad scuta specifica detecta, et addita copia speciminum propriorum et fluorescentium adhibetur ut vexillum internum ditionis ornamenti ad detectionem genesis endogenae domesticae custodiendae.
Principium probatum est quod specillum fluorescentium concoquitur et deprimitur ab exonuclease activitatis Taq enzyme in PCR reactionis, ita ut nuntius fluorescentium coetus et coetus fluorescentium exstincti separentur, ita ut ratio magna fluorescentium fluorescentium recipere possit. signum, ac deinde per amplificationem effectus PCR amplificationis, fluorescens signum speciminis attingit valorem limen -Ct valorem (Cycle limen). Cum in scopo nullo amplicon agitur, notarius coetus speciminis prope exstinguitur. Hoc tempore, fluorescentiae resonantiae energiae translatio fit, et volubilitas coetus notarii exstinguitur a globo extincto, ut signum fluorescentium pcr instrumentum fluorescentium deprehendi non possit.
Ad monitorem reagentium usum in probatione, ornamentum positivis et negativis moderandis instructum: imperium positivum recombinante plasmida continet, et imperium negativum aqua destillata est, quae ad pollutionem environmental monitorem adhibetur. Commendatur ponere potestatem positivum et imperium negativum eodem tempore cum tentat.
.Main components .
Cat. No. | BST-SARS-25 | BST-SARS-DR-25 | Componbus | |
Name | Specification " | Quantinter illos | Quantinter illos | |
Positivum imperium | 180 μL/phial | 1 | 1 | Plasmids artificiose construitur, aqua decocta |
Negans imperium | 180 μL/phial | 1 | 1 | decocta |
SARS-Cov-2 Mix | 358.5 μL/vial | 1 | / | Imprimis paria primarum specierum deprehensio fluorescentium rimarum, dNTPs, , MgCl2, KCl, Tris-Hcl, Aquae destillatae, etc. |
Enzyme Mix | 16.5 μL/phial | 1 | / | Taq enzymes, reverse transcriptase, UNG enzymes, etc. |
SARS-Cov-2 Mix(Lyophilised) | 25 test/phial | / | 1 | Imprimis paria prima, speciosa deprehensio fluorescentium speculatoria, dNTPs, Taq enzymes, transversa transcriptase, aqua destillata, etc. |
2x Buffer | 375 μL/phial | / | 1 | MgCl2, KCl, Tris-Hcl, Aquae destillatae, etc. |
Nota.(1) Partes in diversis massae conlatae permisceri vel permutari non possunt.
(2) Praeparate proprium gerentem: Acidum nuclei extractionis ornamentum.
.Storage conditions et expiration date .
For BST-SARS-25:Transporto et condo ad -20±5℃ per longum tempus.
For BST-SARS-DR-25:Locus ad transportandum tortor. Congregem ad -20±5℃ diu.
Saepe duratus- CALEFACTO cycles vitare. Validitas periodus tentative pro 12 mensibus ponitur.
Vide pittacium pro tempore fabricandi et utendi.
Post primum foramen, reagens condi potest ad -20±5°C ad non plus quam 1 mensem vel usque ad finem periodi reagenti, utramlibet tempus praeveniat, ne repetitis cyclis congelatur cyclos et numerus reagens gelatur. -thaw circuitus non excedunt VI temporibus.
.Applicable instrument.ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.
.Sample requirements .
1.Applicable sample type: nucleicum acidum solutionem extrahi.
2.Sample repositionis et vecturae: repone ante 20±5℃pro 6 mensibus. Constringe et prehende exempla non plus quam 6 temporibus.
.Testing method.
1.Nucleic acid extraction
Aptum acidum nucleicum elige extrahendi ornamentum ad acidum viralem extrahendi et sequere ornamentum instructionum correspondentium. Commendatur uti acidi nuclei extractionis et purificationis ornamentum a Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co, Ltd. vel ornamentum purificationis acidi nucleici aequivalens.
2. Reac *tion reagent preparation
2.1 For BST-SARS-25:
(1) Sars-Cov-2 Mix et Enzyme Mix remove, omnino liquefacies ad cella temperiei permisceto vortice fabricam et postea breviter centrifugium.
(2) 16.5uL Enzyme Mixtum 358.5uL SARS-Cov-2 Mixtum et mixtum penitus ad solutionem reactionis mixtae obtinendam accessit.
(3) Praeparate mundum 0,2 mL pcr tubum octalem et signa cum 15uL solutionis reactionis mixtae supra bene.
(4) Adde 15 μL solutionem acidi nuclei purgati, imperium affirmativum et imperium negativum, et tubo octali diligenter tegunt cap.
(5) Misce, bene invertendo inverso, et celeriter fabricando, ut liquorem in fundo tubi inclinet.
1
2.2 For BST-SARS-DR-25:
( 1) Adde 375ul 2x Buffer to SARS-Cov-2 Mix ((Lyophilised) ut reactionem miscere permisceto. Permisceto tibiis et dein centrifugium breviter. ( Cum reactionem mix paratur, commendatur ut in -20℃ congreget. longum tempus repono. )
(2) Pone tubo puro 0.2 mL PCR octal et nota cum 15µL reactionis per bene misce.
(3) 15μL Adde solutionem acidi nuclei purgati, imperium affirmativum et imperium negativum, et tubo octali diligenter tegunt cap.
(4) Misce, bene invertendo inverso, et celeriter fabricando, ut liquorem in ima tubi colligat.
3. PCR amplifi*cation .Placere referri ad instrumentum manual pro occasus operandi..
3. 1 Pone PCR 8-tubam in thalamum sample instrumenti fluorescentis PCR, et pone specimen probandum, imperium positivum et imperium negativum secundum ordinem loading.
3.2 Fluorescentium deprehensio alvei:
(1) ORF1ab gene deprehensio canalis FAM (Notario: FAM, Quencher: Nemo).
(2) N gene canalem VIC detectionis eligit (Notator: VIC, Quencher: Nullus).
(3) Vexillum internum generum deprehensio canalis CY5 eligit (Notator: CY5, Quencher: None).
(4) Relatio passiva ad ROX ponitur.
3.3 PCR occasum programma parametri:
Gradus | Temperatus(℃) | Tempus | Numerus circuitus | |
1 | Reverse transcription reaction | 50 | 15 min | 1 |
2 | Taq enzyme activation | 95 | 2.5 min | 1 |
3 | Taq enzyme activation | 93 | 10 s | 43 |
Annealing extension and fluorescent acquisition | 55 | 30 s |
Post occasum, tabellam serva et curriculum reactionis currite.
4.Results analysis
Postquam fines programmatis, eventus automatice salvantur, et amplificatio curva enucleatur. Ampliatio curva instrumenti ad limen defaltam apponitur.
.Explanation of test results * .
1. Determinare validitatem experimenti: Imperium positivum FAM, VIC canalem habere debet amplificationem typicam curvam, et CT valorem fere minus quam 34, sed fluctuare potest propter diversorum uncinorum diversorum instrumentorum limina. FAM, VIC canalis negativa non ampliari debet Ct. Constat praedictas requisitiones simul occurrere debere, alioquin haec probatio invalida est.
2. Ex iudicio
FAM/VIC channel | Judicium eventum |
Ct<37 | Sample test positivum est |
37≤Ct<40 | Ampliatio curva S informata est, et specimina suspecta denuo examinanda sunt; si re- probatio exitus constant, iudicatur positivo, secus negativo |
Ct≥40 aut nulla amplificatio | Sample test negans est (vel infra terminum de inferioribus ornamentum deprehensio) |
Nota: (1) Si ambo canalis FAM et VIC alveus positivi simul sunt, SARS-Cov-2 positiva esse statuitur.
(2) Si canalis FAM vel VIC alveus positivus est et alter alveus negativus est, iterari debet probatio. Si positivus simul sit, iudicabitur ut SARS-Cov-2 positive, secus iudicabitur ut SARS-Cov-2 negativa.